英国OXOID CT0107B 阿米卡星药敏实验纸片

英国OXOID CT0107B 阿米卡星药敏实验纸片​说明书

【产品名称】

通用名称：英国OXOID CT0107B 阿米卡星药敏实验纸片

英文名称：Amikacin Susceptibility Test Disc

【包装规格】

5×50 片 / 盒

【预期用途】

本产品旨在通过体外实验检测阿米卡星对细菌的有效性。有几种实验室方法

适用于纸片扩散法。用户应当参考当地的指导原则，获取关于培养基的选择，接

种量，培养条件和抑菌圈判读标准的详细信息。

【检测原理】

在滤纸片中渗入一定量的抗生素，然后将纸片贴在事先接种了测试菌液的琼

脂平板表面，抗生素扩散形成浓度梯度。培养结束后，检测纸片周围的抑菌圈，

并与特定抗生素产生的认可的抑菌圈范围相比较，就可以判断细菌对抗生素的敏

感程度。

【主要组成成份】

每张纸片直径 6 毫米，含四环素 30ug，纸片两面都清晰印有抗生素编码缩写

AK 和剂量 30ug。

需要但未提供的材料

装有适量培养基的琼脂平板、接种用的混悬培养基、无菌接种环和拭子、无

菌镊子、麦氏浊度标准液、培养箱、改良的气体环境、抗生素纸片分配器、质控菌株、

测量抑菌环大小的工具，以及当地标准方法的判读标准。

【储存条件及有效期】

未开封的塑料管必须存放在 -20℃—8℃，有效期 3 年，直至需要方可取出。

未开封的塑料管在开封前回复至室温以减少冷凝水。塑料管一旦开封，需要放置

于分配器内保存（请确认分配器内放置了干燥剂）。分配器在冷藏室中保存，打

开前应回复至室温。如果塑料管不是放置于分配器中，用户应当保证纸片保存在

冷藏室中并避免潮湿。一旦塑料管开封，建议保存时间不要超过 7 天。只适于未

开封并在适宜条件下储存的产品。

【样本要求】

供试微生物应是从培养基中挑取的新鲜的、纯的临床分离株。如有可能，标

本应在开始抗微生物治疗前，就从患者处采集。

【检验方法】

用法：

本品可用于多种标准的检测方法，其中包括但限于 BSAC、CDS、DIN、

CLSI M2 或 EUCAST。请参考现行的当地指导原则，获取关于培养基的选择，

接种量和培养条件的详细信息。

CLSI 方法小结：（其它标准会有差异）

1CN140692

CT0107B

培养基：Mueller-Hinton 琼脂用于检测非苛养微生物。含 5% 羊血的 Mueller

Hinton 用于检测脑膜炎奈瑟氏菌和链球菌，含 1% 精制生长添加剂的 GC 琼脂用

于检测淋病奈瑟氏菌，嗜血杆菌检测培养基用于检测流感嗜血杆菌和副流感嗜血

杆菌。关于检测其它苛养菌或罕见菌的培养基和生长条件可参考 CLSI 第 M45 章。

平板培养基和药敏纸片在使用前要回复至室温。平板培养基在接种前不应有过多水分。

供试微生物：采取适当的检测方法来核实供试微生物的推测鉴定结果。采用

直接菌落法或生长法制备的标准化接种物应在 15 分钟内接种到制备好的平板培

养基上：生长法—用接种环挑取 3 至 5 个形态上相似的独立菌落，并移至 4-5ml

的胰蛋白胨大豆肉汤或类似培养基中，在 35℃下培养 2-6 小时。用无菌生理盐

水或肉汤调整浊度，使之达到 0.5 个麦氏浊度标准（将 0.5ml 的 0.048M 氯化钡

[1.175%wt/vol BaCl2.2H2O] 加 到 99.5ml 的 0.18mol/l 硫 酸 [1%vol/vol] 中 ,

制成 0.5 个麦氏浊度标准液—避光保存）。直接菌落法（葡萄球菌和链球菌的方法）—在非选择性琼脂上挑取分离的菌落，至于无菌生理盐水或肉汤中，并

制成等于 0.5 麦氏浊度标准的菌悬液。

接种：将无菌拭子浸入菌悬液中，在试管壁上旋转按压，挤出多余的培养液。在

平板培养基表面至少沿着三个方向涂布平板表面。接种后 15 分钟内将药敏纸片置

于平板上。

药敏纸片：使用前将药敏纸片回复至室温。单块平板培养基上放置的药敏纸片

数量如下：

在贴上药敏纸片的 15 分钟内翻转平板，并按照下面的规定培养：

* 葡萄球菌和肠球菌需要培养 24 小时。耐甲氧西林的葡萄球菌可能在温度超过

35℃的条件无法检出。

质量控制程序：

建议以适当的间隔检测质控菌株；既可在每次检测时进行质控，也可以根据国家

标准机构提供的抗生素敏感性检测指南推荐的程序进行质控。如果某种质控菌株检测菌

单块平板推荐的药敏纸片数量：

淋病奈瑟氏菌、副流感嗜血杆菌、流感嗜血杆菌和链球菌

9 张 /140-150mm 平板，

或者 4 张 /90-100mm 平板

脑膜炎奈瑟氏菌

5 张 /140-150mm 平板，

或者 2 张 /90-100mm 平板

非苛养菌

12 张 /140-150mm 平板，

或者 5 张 /90-100mm 平板

检测菌：

培养要求：

流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌

5%CO2,35±2℃，16-18 小时

淋病奈瑟氏菌

5%CO2,36±1℃，20-24 小时

脑膜炎奈瑟氏菌

5%CO2,35±2℃，20-24 小时

非苛养菌 *

需氧，35±2℃，16-18 小时

链球菌

5%CO2,35±2℃，20-24 小时CN14069

3

CT0107B

在贴上药敏纸片的 15 分钟内翻转平板，并按照下面的规定培养：

K．对于沙门氏菌和志贺氏菌，氨基糖甙类药物可能在体外具有活性，但在临床

上却没有效果并且不应报告为敏感。

【检验结果的解释】

培养后，测量*抑菌区域的直径，读数到毫米数值。抑菌环的边缘应为肉眼

可以发现的无明显微生物生长的区域。对于血平板，应在反射光环境中对平板上

表面进行判读（不判读溶血区域边缘，仅包括细菌生长边缘）。所有其他培养基

应在黑色背景和反射光环境中对平板背面进行判读（葡萄球菌和肠球菌除外，应

在透射光下进行判读 - 微弱的生长提示耐药）。对于变形杆菌，应忽视明显抑制

区域内的迁徙性生长形成的薄膜。对结果进行判读的完整说明可依照 CLSI 方法

，请参考现行版的 CLSIM100 标准。附表只提供了 CLSI 标准所述的药物 / 浓度。

【检验方法的局限性】

本产品供体外诊断使用，仅用于指示供试微生物的体内敏感性。选择何种抗微生

物药物进行测试和报告必须由每个临床实验室来决定。临床医生负责决定使用何

种抗生素对抗供试微生物。

【参考值（参考范围）】

摘自 CLSI 文件 M100-S20(M02-A10)：“药敏纸片扩散法补充表”抗微生物敏感

性检测性能标准。

试验培养物（抑菌环直径，mm）

抗生素

药敏纸片代码 效价

耐药

介于两者之间 敏感

阿米卡星

AK

30μg

肠杆菌 K、 铜

绿假单胞菌、

不动杆菌和葡萄球菌

≤ 14  15-16

≥ 17

针对一种特定抗生素的结果超出规定范围以外，不得出具患者检测报告，并不应

使用该药敏纸片，直至确定产生差异的原因（如培养基、灌装量、接种物、培养

条件、质控菌株、不适宜的储存条件或纸片使用不当）。

表 1 摘自 CLSI 文件 M100-S20(M02-A10)：“药敏纸片扩散法补充表”抗微生

物敏感性检测性能标准。

质量菌株（抑菌环直径，mm）

【注意事项】

仅供体外诊断使用。遵守使用说明。整个操作过程中都要采用无菌技术并遵守

针对所有微生物危害建立的预防措施的规定。按照生物危害废弃物操作和处理指

南的指导，必须对使用后的培养物、容器和其它被污染物进行灭菌。勿使用过期

产品。一旦开启纸筒，需确保其存放在黑暗干燥的环境中，以防止抗生素降解。

如果纸片在推荐的质控菌株培养基上未产生预期的抑菌环，需检查全部操作流程。