鉴定试剂盒分为A部分和B部分,共有24项传统生化测试,微生物的发酵反应使培养基颜色发生变化。待鉴定的菌株应先进行分离纯化。从营养琼脂或胰蛋白酶大豆蛋白胨琼脂中挑取菌落接种于5ml脑心提取液中,35-37℃培养4-6小时至接种液在620nm处浊度≥0.1od或0.5mcfarland标准。打开无菌套件并撕下密封。每孔50μL上述菌液。接种环也可用于划线。35℃-37℃孵育18-24小时。根据结果解释表格。
鉴定试剂盒即可使用,用户只需要提供病毒样本,根据地黄保守序列设计的特异性引物与相关病毒无交叉反应。灵敏度可达数百份/反应。一管荧光定量PCR检测,避免后续污染。该试剂盒足以进行L反应体系的50倍和20倍μ荧光定量PCR。本产品仅适用于科学研究,不能用于临床诊断。
鉴定试剂盒实验过程:
1、试剂制备区、样品处理区和PCR扩增区的整个检测过程应严格按照本手册的要求进行。各区实验服、仪器、耗材应单独使用,不得混用;实验采用带滤芯的吸头;样品处理区应设置生物安全柜,样品处理应在生物安全柜内操作;三区均应配备紫外线杀菌装置。
2、为避免RNA降解,样品处理过程应在0-4℃下进行,实验结束后立即进行检测;样品处理中使用的仪器和耗材应无核酶处理。
3、每次实验应设置阴性和阳性对照。
4、试剂盒内所有试剂在使用前应在室温下充分融化混合,并瞬间离心。
5、试剂盒中的所有阴性和阳性对照在使用前应转移到样品制备区并分开存放。
6、为防止荧光干扰,避免赤手直接接触PCR反应管,避免在PCR反应管上做任何标记。
7、仪器放大的相关参数按本手册的相关要求设置;不同批次的试剂不能混用。
8、在ABI系列荧光定量PCR仪的参数设置中,没有选择Rox校正,也没有选择淬灭基因。
9、实验过程中产生的产品废弃物,应经无害化处理后处理。